如何配置培養(yǎng)基？

你知道該如何配置培養(yǎng)基嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)全程注意事項(xiàng)

1.無(wú)菌操作是重中之重，細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌條件比較苛刻，實(shí)驗(yàn)人在進(jìn)行整個(gè)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌意識(shí)一定要強(qiáng)，否則一個(gè)不小心，發(fā)生細(xì)菌污染，輕則浪費(fèi)細(xì)胞，重則污染整個(gè)培養(yǎng)箱。

2.實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入細(xì)胞房前應(yīng)該換上干凈的鞋子、白大褂、手套和口罩。

3.所有耗材放入工作臺(tái)前都需用75%酒精進(jìn)行消毒，雙手進(jìn)入工作臺(tái)前也需要用75%的酒精進(jìn)行消毒。

4.進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前應(yīng)先對(duì)工作臺(tái)進(jìn)行紫外滅菌30min以上，并將所有需要用到的耗材放到工作臺(tái)上一起進(jìn)行紫外滅菌（簡(jiǎn)稱(chēng)照臺(tái)）。

5.使用酒精燈的實(shí)驗(yàn)室需要特別注意安全，剛噴灑完酒精的物品不要靠近酒精燈，有生物安全柜的實(shí)驗(yàn)室則不需要使用酒精燈。

6.進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前應(yīng)先用酒精棉擦拭工作臺(tái)，所有操作都應(yīng)在靠近酒精燈火焰下方進(jìn)行（有生物安全柜的則不需要使用酒精燈）。

7.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)及時(shí)將垃圾處理，再用酒精棉擦拭工作臺(tái)，對(duì)工作臺(tái)進(jìn)行紫外滅菌30min以上。

二、配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基

1. 準(zhǔn)備材料：

50mL離心管、封口膜、鑷子、移液槍、DMEM培養(yǎng)液、雙抗、胎牛血清等。

2. 操作步驟：

（1）用移液槍吸取44mL的DMEM培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移至離心管中。注意槍頭不要碰到培養(yǎng)液瓶口。

（2）用移液槍吸取1mL的雙抗，轉(zhuǎn)移至離心管中，吹打混勻。

（3）用移液槍吸取5mL的胎牛血清，轉(zhuǎn)移至離心管中，吹打混勻。

（4）用封口膜將離心管封口，置于4℃保存。

（5） 雙抗、胎牛血清置于-20℃長(zhǎng)期保存，置于4℃短期保存。

（6）DMEM培養(yǎng)液置于4℃保存。

3. 注意事項(xiàng)：

（1）配制好的培養(yǎng)基盡快使用，一般可存放三個(gè)月左右，放置久了里面的物質(zhì)可能會(huì)失活，培養(yǎng)出來(lái)的細(xì)胞狀態(tài)就不這么好了。

（2）使用移液槍時(shí)，注意槍頭不要碰到任何東西，如果碰到了，不要猶豫馬上丟棄。

（3）雙抗、胎牛血清應(yīng)避免反復(fù)凍融，可根據(jù)需要將其分裝保存。

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