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當前位置:首頁技術文章Wako之質譜級賴氨酸肽鏈內切酶(125-05061)介紹

Wako之質譜級賴氨酸肽鏈內切酶(125-05061)介紹

更新時間:2024-01-23點擊次數:1279

本產品是質譜分析前處理時zui常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內切酶,該酶可以特異性切除賴氨酸基團C末端的多肽,可用于蛋白測序分析和Lys-X化合物的酶合成。若同時使用賴氨酰肽鏈內切酶和胰酶,可更好地切斷賴氨酸 基團的多肽,增加多肽的數量。產品已按照使用習慣做成小包裝,是方便使用的冷凍干燥品。下面讓我們一起來看看Wako質譜級賴氨酸肽鏈內切酶(125-05061)的產品介紹吧!

一、產品屬性

來源:細菌

外觀:凍干粉(包含2 mmol/L Tris-HCl緩沖液,pH 8)

活性:0.03~0.07 AU/vial

分子量:27,000(瓊脂糖過濾),30,000(SDS-PAGE)

溶解性:溶于水或緩沖液

穩(wěn)定性:溶解于pH值5.0-12.0的Tris緩沖液中,可在4℃穩(wěn)定保存2年;在pH值6.0-11.0 30℃時能穩(wěn)定保存,但溫度超過50℃時不穩(wěn)定。

最適pH值:9.0~9.5

等電點:6.9~7.0

底物特異性:

可水解底物——Tos-Lys-OMe,Bz-Lys-NH2,Bz-Lys-pNA,Lys-pNA

不可水解底物——Bz-Arg-NH2,Bz-Arg-pNA,Arg-pNA

抑制劑:DFP,PMSF,TLCK

二、特點

(1)高特異性、高蛋白質消化率、適用于蛋白質譜分析

(2)提高裂解效率、增加肽段數量

(3)根據使用量特意制備小包裝,方便使用

三、應用

分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴氨酰肽鏈內切酶 (Lys-C) 和Tp與Lys-C聯用進行膠內酶切的效果比較。牛血清蛋白BSA 的條帶(100 ng) 通過SDS-PAGE 獲得,然后分別用Tp、Lys-C和Lys-C+Tp進行酶切,再用MALDI-TOFMS法進行分析。這些蛋白酶的實驗效果見下表。

圖片

圖片

胰蛋白酶 (Tp)(圖a) 和賴氨酰肽鏈內切酶 (Lys-C)+Tp (圖b) 酶切后的質譜結果對照圖。

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