以下是 Polyplus jetPRIME® 轉染試劑 的標準操作步驟（適用于貼壁細胞），操作前請確認細胞狀態、核酸純度及實驗條件適配性。

一、試劑準備

二、 Polyplus jetPRIME® 轉染試劑操作流程（24孔板為例）

 Day 0: 細胞鋪板

1. 細胞計數：消化對數生長期細胞，調整密度。  

2. 鋪板：  

   - 每孔加入 0.5~1×10? cells（貼壁細胞）  

   - 用 500μL wan-quan培養基（含10%血清+抗生素）培養。  

   - 關鍵：轉染時細胞密度需達 70~90% 匯合度（過度生長降低效率）。

 Day 1: 轉染（耗時<15分鐘）

> ?? 所有步驟在無菌環境（超凈臺）操作，試劑室溫平衡。

 三、關鍵優化參數

 四、懸浮細胞轉染步驟

若轉染懸浮細胞（如Jurkat、THP-1）：  

1. 離心收集細胞 → 重懸于 新鮮培養基（密度 0.5~1×10? cells/mL）。  

2. 按 1mL細胞懸液 + 混合液（1μg DNA + 2μL jetPRIME） 加入EP管。  

3. 輕柔混勻 → 37℃靜置 15~30分鐘 → 轉移至培養板繼續培養。

 五、 Polyplus jetPRIME® 轉染試劑使用注意事項

1. 細胞狀態：僅用健康、低傳代細胞（傳代<30）。  

2. 試劑保存：jetPRIME® 4℃避光保存（非-20℃），保質期內穩定。  

3. 避免污染：核酸和Buffer嚴格無菌操作。  

4. 毒性處理：若細胞死亡率高：  

   - ↓ 降低jetPRIME用量（如1μg DNA用1.5μL試劑）  

   - ↓ 縮短轉染后培養時間（24h后換液）。  

5. 對照設置：必設 空載體對照組 + 未轉染組。

 六、Polyplus jetPRIME® 轉染試劑替代方案（特殊情況）

問題排查：若效率低 → 檢查核酸純度、細胞密度、試劑比例；或聯系 polyplus代理——天津益元利康生物科技有限公司獲取技術支持。