基質膠凝固不良？本文解析體內移植/類器官/血管生成三大場景稀釋比例，提供PBS無血清培養基稀釋公式+操作避坑清單！  

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康寧基質膠使用方法

基質膠凝固了怎么辦

一、通用稀釋原則（牢記核心參數）  

? 稀釋液選擇優先級：  

冷無血清培養基 ＞ DMEM/F12 ＞ PBS（僅限體內注射）  

?? 禁忌：  

- ? 含血清培養基（引發提前凝固）  

- ? 高溫操作（＞10℃導致纖維蛋白變性）  

 二、不同實驗場景稀釋比例表  

> ?? 濃度換算公式：  

> 終濃度 (mg/mL) = 原膠濃度 × [V_膠/(V_膠+V_稀釋液)]  

> （康寧基質膠原液濃度約8-12 mg/mL，批號差異需查COA）  

 三、分步操作流程（防凝固核心技巧）  

 Step 1 解凍與混勻  

1. 4℃冰箱解凍過夜（嚴禁37℃水浴！）  

2. 預冷移液槍頭至4℃  

3. 輕柔上下吹打≤10次（避免氣泡破壞層黏連蛋白）  

 Step 2 稀釋操作  

 Step 3 鋪膠固化  

四、4大高頻問題急救方案  

 問題1：膠體不凝固  

- 根因：  

  - 操作溫度＞10℃ → 冰上重置操作臺  

  - 血清污染 → 更換無血清稀釋液  

- 挽救步驟：  

  1. 回收膠體至冰上EP管  

  2. 補加 1/10體積未稀釋膠  

  3. 重新鋪板  

 問題2：細胞懸浮不下沉  

- 對策：  

  - 提高基質膠濃度至 ≥6 mg/mL  

  - 添加 2mg/mL膠原蛋白I（增強錨定）  

 問題3：膠內出現裂紋  

- 預防方案：  

  - 聚合后表面滴加 100μl培養基（防干燥）  

  - 避免移動未wanquan固化的培養板  

 五、稀釋液替代方案（無血清環境）  

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